Talaan ng mga Nilalaman:

Paano mo mahahanap ang konsentrasyon ng DNA mula sa pagsipsip?
Paano mo mahahanap ang konsentrasyon ng DNA mula sa pagsipsip?

Video: Paano mo mahahanap ang konsentrasyon ng DNA mula sa pagsipsip?

Video: Paano mo mahahanap ang konsentrasyon ng DNA mula sa pagsipsip?
Video: Gel Electrophoresis and DNA Fingerprinting Explained 2024, Nobyembre
Anonim

Konsentrasyon ng DNA ay tinatantya sa pamamagitan ng pagsukat ng pagsipsip sa 260nm, inaayos ang A260 pagsukat para sa labo (sinusukat ng pagsipsip sa 320nm), pag-multiply sa dilution factor, at paggamit ng relasyon na ang isang A260 ng 1.0 = 50µg/ml purong dsDNA.

Gayundin, ang mga tao ay nagtatanong, paano mo mahahanap ang konsentrasyon ng DNA?

Upang matukoy ang konsentrasyon ng DNA sa orihinal na sample, gawin ang sumusunod na kalkulasyon:

  1. konsentrasyon ng dsDNA = 50 μg/mL × OD260 × kadahilanan ng pagbabanto.
  2. konsentrasyon ng dsDNA = 50 μg/mL × 0.65 × 50.
  3. konsentrasyon ng dsDNA = 1.63 mg/mL.

Gayundin, ano ang isang magandang konsentrasyon ng DNA? A mabuti kalidad DNA ang sample ay dapat may A260/A280 ratio ng 1.7-2.0 at isang A260/A230 ratio na higit sa 1.5, ngunit dahil ang sensitivity ng iba't ibang mga diskarte sa mga contaminant na ito ay nag-iiba, ang mga halagang ito ay dapat lamang kunin bilang gabay sa kadalisayan ng iyong sample.

Sa ganitong paraan, sumisipsip ba ang DNA sa 280 nm?

Ang ratio ng absorbance sa 260 nm vs 280 nm ay karaniwang ginagamit sa pagtatasa DNA kontaminasyon ng mga solusyon sa protina, dahil ang mga protina (sa partikular, ang mga mabangong amino acid) sumipsip ilaw sa 280 nm.

Paano mo ginagamit ang NanoDrop para sa konsentrasyon ng DNA?

Talaga ang nanodrop nagbibigay sa iyo ng opsyong pumili DNA , RNA, Mga protina. Kailangan mong pumili DNA , pagkatapos ay maglagay ng 2 ΜL ng tubig (mili Q preferent) piliin ang "Blank" pagkatapos na ilagay ang isa pang 2 ΜL ng tubig upang kumpirmahin na ang sukat ay 0. Pagkatapos ay ilagay ang 2 ΜL ng iyong sample. Makukuha mo ang pagsukat.

Inirerekumendang: