Mayroon bang iba pang mga paraan upang linisin ang mga produkto ng PCR?

2024 May -akda: Miles Stephen | [email protected]. Huling binago: 2023-12-15 23:41

Para sa mga application na nangangailangan PCR paglilinis o pagpapatunay ng PCR resulta, doon dalawang paraan karaniwang sinusunod: produkto ng PCR paghihiwalay gamit ang isang haligi, at gel paglilinis mula sa isang agarose gel.

Dito, anong uri ng chromatography ang ginagamit upang linisin ang mga produkto ng PCR?

Upang linisin ang mga produkto ng PCR, ginagamit ang size exclusion chromatography. Binitag nito ang maliliit na molekula tulad ng protina, mga panimulang aklat , at mga nucleotide habang ang malalaking molekula tulad ng mga produkto ng PCR ay masyadong malaki upang makapasok sa mga kuwintas at dumaan sa column patungo sa mga tubo ng koleksyon.

Gayundin, paano mo nililinis ang DNA? Talaga, maaari mo maglinis iyong DNA sample sa pamamagitan ng lysating ng iyong cell at/o tissue sample gamit ang pinakaangkop na pamamaraan (mechanical disruption, chemical treatment o enzymatic digestion), paghihiwalay ng mga nucleic acid mula sa mga contaminant nito at precipitating ito sa isang angkop na buffer solution.

Bukod pa rito, bakit natin dinadalisay ang produkto ng PCR?

Paglilinis ng DNA mula sa a PCR Ang reaksyon ay karaniwang kinakailangan para sa paggamit sa ibaba ng agos, at pinapadali ang pag-alis ng mga enzyme, nucleotides, primer at mga bahagi ng buffer. Ang mga karaniwang ginagamit na pamamaraan ay gumagamit ng mga spin column na naglalaman ng silica matrix kung saan ang DNA ay maaaring piliing itali sa pagkakaroon ng mga chaotropic salt.

Bakit kailangang linisin ang DNA?

Kami malinis pataas DNA mula sa mga may tubig na solusyon upang alisin ang mga buffer salt, enzyme o iba pang mga sangkap na maaaring makaapekto sa mga aplikasyon sa ibaba ng agos. Kasama sa mga halimbawa ang reaksyon ng PCR malinis pataas, malinis up pagkatapos restriction digests at malinis up ng genomic o plasmid DNA kontaminado ng cellular proteins/debris.