Ano ang karaniwang nagsisilbing DNA cloning vector?
Ano ang karaniwang nagsisilbing DNA cloning vector?

Video: Ano ang karaniwang nagsisilbing DNA cloning vector?

Video: Ano ang karaniwang nagsisilbing DNA cloning vector?
Video: Introduction to Genetic Engineering 2024, Disyembre
Anonim

Maraming uri ng pag-clone ng mga vector , ngunit ang karamihan karaniwan ang mga ginamit ay genetically engineered plasmids. Pag-clone ay karaniwang unang gumanap gamit ang Escherichia coli, at pag-clone ng mga vector sa E. coli ay kinabibilangan ng plasmids, bacteriophage (tulad ng phage λ), cosmids, at bacterial artificial chromosome (BACs).

Tinanong din, ano ang vector sa DNA cloning?

Sa molekular pag-clone , a vector ay isang DNA molecule na ginagamit bilang isang sasakyan upang artipisyal na magdala ng dayuhang genetic material sa isa pang cell, kung saan maaari itong kopyahin at/o ipahayag (hal., plasmid, cosmid, Lambda phages). A vector naglalaman ng dayuhan DNA ay tinatawag na recombinant DNA.

Alamin din, paano mo i-clone ang isang vector? Eksperimental na Pamamaraan

  1. Patakbuhin ang PCR at linisin ang produkto ng PCR: Patakbuhin ang PCR upang palakasin ang iyong insert DNA.
  2. Digest ang iyong DNA:
  3. Ihiwalay ang iyong insert at vector sa pamamagitan ng gel purification:
  4. Ligate ang iyong insert sa iyong vector:
  5. Pagbabago:
  6. Ihiwalay ang Tapos na Plasmid:
  7. I-verify ang iyong Plasmid sa pamamagitan ng Sequencing:

Kaugnay nito, paano gumagana ang pBR322 bilang isang cloning vector?

pBR322 Plasmid pBR322 ay isa sa mga unang plasmid na ginamit para sa layunin ng pag-clone . Naglalaman ito ng mga gene para sa paglaban sa tetracycline at ampicillin. Pagpasok ng DNA sa mga partikular na lugar ng paghihigpit pwede hindi aktibo ang gene para sa tetracycline (isang epekto na kilala bilang insertional inactivation) o paglaban sa ampicillin.

Aling pamamaraan ang nagpapahintulot sa maraming kopya ng isang partikular na seksyon ng DNA na magawa nang napakabilis?

Polymerase chain reaction

Inirerekumendang: